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Ella全自動微流控免疫分析儀

全自動化

手動設置10-15 min，1 h時獲得數據結果。與傳統ELISA 3-6 h檢測流程，80 min手動設置相比，加快實驗數據周轉速度。

高靈敏度

采用微體積反應管和高質量ELISA抗體對。多因子檢測時，完全獨立反應流路，避免了交叉反應。

極佳實驗重復性

Ella系統可全程自動完成，所有免疫學反應都發生在卡盒微流通道內，消除了人工操作的誤差，實現數據結果的低CV值，高重復性，利于大樣本量平行對比和臨床樣本長時間動態監測。

應用方向

傳染病與感染免疫、細胞與基因治療、神經科學、腫瘤及腫瘤免疫、疾病生物標志物研究

物種

人，小鼠，大鼠，非人靈長類

客戶根據不同需求選擇Simple Plex 卡盒

全自動微流控免疫檢測設計

Ella這種“一鍵敲擊”的全自動免疫檢測技術徹底顛覆了傳統，創新性將特異性檢測抗體包被在微流體玻璃反應管(Glass Nano Reactor，GNR)中，每個GNR內徑為70um，長250um，再將GNR嵌入全自動微流體免疫檢測管。同時將生物素標記檢測抗體，熒光標記鏈霉親和素預先密封在檢測板上。EllaTM系統可自動取樣本，洗滌，取檢測抗體雜交，洗滌，取熒光標記鏈霉親和素與生物素標記檢測抗體結合，最后自動輸出3個平行GNR的數據及均值。全程免疫反應和結果檢測無需人工參與。

Ella采用雙抗夾心的原理，抗體對來自R&D system，具有高親和力，高特異性的特點。卡盒為全封閉檢測空間，能極大地降低噪音。通過Biotin-Streptavidin信號放大系統，熒光信號的高線性范圍可達4個log以上。卡盒采用微流控設計，節省珍貴樣本的用量。Ella為全自動檢測，能實現檢測的標準化。

檢測只需三步

應用領域

1. 感染性休克炎性生物標志物檢測

心肌功能障礙在膿毒癥中很常見，但最佳治療策略尚不清楚。左旋西門丹被認為是一種可能的治療方法，但在膿毒癥(LeoPARDS)試驗中，左旋西門丹預防急性器官功能障礙的試驗發現，左旋西門丹對減少膿毒性休克中的器官功能不全起作用。英國帝國理工學院圣瑪麗醫院ICU的研究者評價了左旋西門丹在生化性心功能不全患者中的作用，并觀察了其非肌力作用。研究者使用Ella測量了血漿中 5 種炎癥生物標志物，以及兩種心臟生物標志物，肌鈣蛋白I (cTnI) 和腦鈉素 N端激素(NT-proBNP)，這些樣本是從招募到 LeoPARDS 試驗的患者前六天樣本中提取。在左旋西門丹組和安慰劑組中，所有測定的炎癥生物標志物CCL 2、IL-6、IL-8、IL-10和sTNFr1均呈類似的下降趨勢。具體見下列圖表。

參考文獻：David B. Antcliffe，et al. Levosimendan in septic shock in patients with biochemical evidence of cardiac dysfunction: a subgroup analysis of the LeoPARDS randomised trial. Intensive Care Medicine. October 2019, Volume 45, Issue 10, pp 1392–1400.

2. 研究哮喘2型免疫反應治療生物標志物

哮喘：哮喘是一種常見的慢性呼吸道疾病，導致氣短、胸悶和咳嗽。癥狀會隨著時間的推移而波動，并可能在惡化期間惡化并導致呼吸衰竭，這些癥狀往往是由病毒性上呼吸道感染引起的，或者較少是由于暴露于空氣過敏原或空氣污染而引起的。哮喘一直被認為是典型的T輔助2(Th2)細胞介導的疾病。

2型免疫型哮喘：內源性哮喘主要是2型免疫型哮喘，其特點是氣道和血液嗜酸性粒細胞增多，以及依賴于2型細胞因子IL-5和IL-13的生物標志物。生物制藥公司研發了大量IL-5和IL-13抗體，其中IL-5單克隆抗體藥物取得了很好的臨床效果，IL-13單克隆抗體均在臨床II期，III期失利。

本研究中招募了26名住院哮喘患者(9名嗜酸性粒細胞過敏; EA，9名非嗜酸性粒細胞過敏;NEA和8名非嗜酸性粒細胞非過敏性; NN)和9名高海拔健康對照21天進行高原治療。治療后，EA患者嗜酸性粒細胞(休眠和活化)和表達CRTH2的CD4+和CD8+ T細胞數量明顯減少。高原治療后，所有哮喘表型中CRTH2+ Tregs顯著下降以及ILC2顯著降低。在高原治療21天后，表達CRTH2的ILC2，CD4+和CD8+ T細胞和Treg細胞對外源PGD2的反應減弱。此外，通過CRTH2的PGD2信號傳導減少了CRTH2+ Tregs的抑制功能，其在高海拔治療期間部分正常化。改善的哮喘控制在過敏性哮喘患者中尤為明顯，并且與EA患者中CRTH2 + Treg細胞降低相關。在具有高基線水平的哮喘患者的氣候治療期間，血清IL-5和IL-13水平降低。綜上，高海拔地區的哮喘治療減少了2型免疫反應，糾正了CRTH2表達增加而引起的失調。

參考文獻：Tadech Boonpiyathad，et al. Impact of High Altitude Therapy on Type‐2 Immune Responses in Asthma Patients.Allergy. 03 July 2019 ,https://doi.org/10.1111/all.13967.

3. 通過Biomarker Panel建立人腹主動脈瘤生長預測評估模型

外科學排名第一的雜志，外科學年鑒(Annals of Surgery)，2019年7月份將刊發牛津大學最新研究成果，利用Ella系統(全自動超敏微流控ELISA系統)，通過檢測人體腹主動脈瘤的蛋白質biomarker(circulating proteins)，并結合生理指標(FMD, AAA size)，對人體腹主動脈瘤的生長情況做預測評估。

根據血管外科學會指南(Vascular Surgery SocietalGuidelines)，預測人體腹主動脈瘤(Abdominal Aortic Aneurysms, AAA)生長的方法，在現有文獻報道中是一個空白。因預測AAA的生長情況，可以對AAAs監測頻率和手術的最佳時機進行多方面的臨床管理。所以目前對AAA生長情況的預測評估，仍然是血管外科學領域研究的重點。本文作者利用先前已報道了血流介導的肱動脈擴張直徑(Flow-Mediated Dilatation:FMD，系統內皮功能的生理標志物)作為AAA進展的新生物標志物。并同時使用2個變量：FMD和在基線測量的AAA直徑，作為未來12個月和24個月的個體患者的腹主動脈瘤生長速度的生理指標。與此同時，作者利用蛋白質Biomarker，即通過Ella系統，檢測關鍵蛋白質Biomarker(circulating proteins:循環蛋白)的變量來改進預測算法。

本文作者利用Ella，驗證人體腹主動脈瘤的蛋白質生物標志物Panel。

參考文獻：Lee R ,et al.Integrated Physiological and Biochemical Assessments for the Prediction of Growth of Abdominal Aortic Aneurysms in Humans, Ann Surg. 2019 Jul;270(1):e1-e3.

4. 游離PD-L1研究

免疫檢查點

PD-L1全稱為程序性死亡-配體1(Programmed Cell Death-Ligand1)，是大小為40KD的第一型跨膜蛋白。當細胞程序化死亡受體-1(PD-1)與細胞程序性死亡-配體1(PD-L1)結合時，可以傳導抑制性信號，從而抑制T細胞的活性，使腫瘤細胞成功逃逸T細胞的免疫檢測和查殺。近年來，PD-1/PD-L1抑制劑(免疫檢查點抑制劑)成為抗腫瘤領域的治療熱點，包括在NSCLC(非小細胞肺癌)、黑色素瘤、腎細胞癌、膀胱癌、尿路上皮癌等多種惡性腫瘤中表現出了臨床有效性。

因PD-L1的表達水平與患者使用免疫檢查點抑制劑的療效存在關聯，所以檢測腫瘤患者體內的PD-L1的表達水平成為評價免疫檢查點抑制劑的療效的關鍵指標。目前對PD-L1的診斷測試仍使用免疫組織化學(IHC)來評分腫瘤微環境。但腫瘤與腫瘤間的異質性，組織來源的多樣性，如細胞學標本，存檔標本與新鮮標本，原發部位與轉移灶等都會影響PD-L1的測定結果。

血清游離型PD-L1水平與腫瘤一線療法評價

美國賓夕法尼亞州赫爾希密爾頓醫療中心，以及多所醫學研究機構的科學家們使用ProteinSimple的Ella微流控免疫檢測系統來檢測PD-L1表達水平，評價其水平升高在HER2陽性轉移性乳腺癌trastuzumab作為一線療法臨床研究中的意義，并陸續在世界頂級醫學雜志JCO(Journal of Clinical Oncology，IF=26.36)上發表文章，以下為文章結果。

Ella微流控免疫檢測系統檢測PD-L1的優勢

• 高靈敏度(2.35pg/ml)
• 寬動態范圍(4-5log)
• 全程自動化/標準化
• 內置標準曲線
• 重復性，穩定性，精準性最佳

參考文獻

1.Circulating PD-L1 (programmed death-ligand 1) and outcomes in a HER2-positive metastatic breast cancer cohort treated with first-line trastuzumab.

2. Elevated serum activin A and PD-L1 and survival in the CCTG MA.31 phase III trial (trastuzumab vs. lapatinib) in first-line HER2+ metastatic breast cancer.

5. 疫苗接種提高造血干細胞移植患者抗感染免疫

造血干細胞移植(HSCT)后的免疫重建是一個復雜而動態的過程，從幾乎完全的免疫抑制狀態到預期的完全免疫恢復。特定的疫苗接種指南建議在HSCT后進行再免疫，但關于這一獨特人群中疫苗效力的數據很少。新的免疫功能試驗可以預測HSCT環境下的疫苗應答。

免疫接種提升HSCT免疫功能研究

由兩百年歷史的法國最著名醫學中心：里昂綜合人民醫院發起的對自體和同種異體HSCT接受者進行前瞻性、縱向單中心隊列研究，以確定病人對5種疫苗(肺炎球菌、乙型肝炎病毒、乙型流感嗜血桿菌、破傷風和白喉)的反應，并與免疫功能指標關聯性。建立了一個研究疫苗血清學反應的工作流程，闡述了100例HSCT患者(50例自體和50例異基因)在初次免疫前和免疫后3、12和24個月的功能免疫狀況。在每個時間點，‘基本’免疫狀態記錄(血清學，免疫表型的淋巴細胞亞群)將被評估。(1)脂多糖或金黃色葡萄球菌腸毒素B刺激全血中腫瘤壞死因子α、干擾素的產生和宿主信使RNA的表達，以及(2) 標準的絲裂原(植物血凝素)刺激引起的T淋巴細胞增殖或對記憶抗原的選擇。參考間隔將從30名健康志愿者中確定。這一轉化研究將提供數據描述HSCT接受者隨著時間的推移免疫反應，免疫功能，并映射HSCT受體的免疫功能。

免疫接種及免疫功能分析流程

免疫功能實驗

五種疫苗免疫接種

參考文獻：VaccHemInf project: protocol for a prospective cohort study of efficacy, safety and characterisation of immune functional response to vaccinations in haematopoietic stem cell transplant recipients，Conrad A, et al. BMJ Open 2019;9:e026093